中国药理学报2023年2期

莫匹罗星原料药有关物质测定方法的建立

杨培1 焦兵1 张建博1

1天方药业有限公司  药物研究院  河南 驻马店  463000

【摘要】目的：建立莫匹罗星原料药有关物质的测定方法。方法：建立莫匹罗星的HPLC分析方法，采用Agilent Zorbax C8（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱，设置色谱柱相关参数，检测波长为240nm，进样量为20μL，观测莫匹罗星和相邻杂质之间的分离度。结果：莫匹罗星原料药及其杂质A、B、C的良好线性关系分别在25~100μg/mL，莫匹罗星及其杂质A、B、C的定量限分别为0.015μg、0.046μg、0.018μg、0.019μg。结论：本研究所建立的莫匹罗星有关物质的测定方法良好，在莫匹罗星原料药有关物质的检测中具有应用价值。

【关键词】莫匹罗星原料药；有关物质；测定方法

【中图分类号】R978.1    【文献标识码】 A   

莫匹罗星在多数的常见致病菌中均具有抗菌效应，在局部感染的临床症状及治疗中发挥作用，且其具有不易发生交叉耐药性、副作用小、局部吸收的量较小等优势，被广泛用于局部抗感染的临床治疗中[1]。莫匹罗星原料药加工、发酵过程中会产生相关杂质，这些杂质不仅会影响莫匹罗星原料药的纯度，还会影响产品的应用效果[2-3]。因此，测定莫匹罗星原料药生产有关物质的杂质含量对最终产品的效果具有至关重要的作用。目前，并未有系统性的测定方法对莫匹罗星及有关物质的检测，部分标准也是按照国外的药典莫匹罗星原料药及莫匹罗星其他制剂的检验方法，本研究建立莫匹罗星原料药有关物质的测定方法，并对方法进行验证分析，为国产莫匹罗星原料药有关物质的测定方案提供参考依据。

1 仪器与试剂  

仪器：高效液相色谱仪（生产厂商：日本Shimadzu，型号：LC-2030 3D）、电子天平（生产厂商：瑞士Mettler Toledo，型号：XPE205）、恒温水浴锅（生产厂商：德上海润度生物科技有限公司，型号：CT bath 01）、高纯水机（生产厂商：美国Millipore公司）。试剂：乙酸铵（物料等级：分析纯，供应商：国药集团化学试剂有限公司）、四氢呋喃（物料等级：色谱纯，生产厂商：德国Merck公司）、高纯度去离子水（由实验室自行制备）。

对照品：对照组：莫匹罗星对照品：批号130568-202201，对照品纯度为95.2%；莫匹罗星原料药有关物质A对照品：批号LAH-50-1，对照品纯度为94%；莫匹罗星原料药有关物质B对照品：批号2-CAL-37-1，对照品纯度为97%；莫匹罗星原料药有关物质C对照品：批号1-CYJ-139-1，对照品纯度为98%。

1.2 样品制备与测定方法

色谱条件：采用Agilent Zorbax C8（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱，色谱条件：柱温为30℃，流动相：a：乙酸铵溶液（取7.6g乙酸铵加水至1000mL，用冰醋酸调节PH值至5.7），b：四氢呋喃；流速：0.5mL/min，检测波长为240nm，进样量为20μL，a、b梯度洗脱比例按照0min：75%流动相a，25%流动相b；6min：75%流动相a，25%流动相b；20min：70%流动相a，30%流动相b；40min：70%流动相a，30%流动相b；400.01min：75%流动相a，25%流动相b；50min：75%流动相a，25%流动相b的程序进行。莫匹罗星与相邻杂质的分离度均应符合要求。

样品制备：取适量莫匹罗星有关物质A、B、C对照品，加入磷酸缓冲液溶解并制成10 μg/mL的溶液，磷酸缓冲液由6g磷酸二氢钠与1000mL水混匀后用氢氧化钠调节pH值至6.3。取适量莫匹罗星原料药对照品，加制备的pH6.3磷酸缓冲液溶解并定量稀释制成每1mL溶剂中含莫匹罗星10μg的溶液，并作为对照品溶液。取适量莫匹罗星原料药，精密称取后，将其置入100mL装量的量瓶中，加入pH6.3磷酸缓冲液并稀释至刻度值后摇匀，作为供试品溶液。

测定方法：吸取已完成制备的对照品溶液、供试品溶液及空白溶液各20μL注入色谱仪中，观测并记录色谱图，根据主成分外标法计算峰值面积中有关物质中杂质的含量。

2  结果

2.1线性范围  

结果显示，莫匹罗星原料药及其有关物质A、B、C在25~100μg/mL范围内具有良好的线性关系，莫匹罗星原料药的线性方程为Y=17500X-1760，r=1.0000，杂质A线性方程Y=16700X-1050，r=1.0000，杂质B线性方程为Y=27800X-2030，r=1.0000，杂质C的线性方程为Y=23300X-1840，r=1.0000。

2.2检测限和定量限  

结果显示 莫匹罗星原料药及其杂质A、B、C的检测限分别为5.3ng、18.0ng、9.6ng、9.7ng，定量限分别为0.015μg、0.046μg、0.018μg、0.019μg。

3  讨论

本研究建立的莫匹罗星原料药有关物质的测定方法可以作为产品质量控制的参考依据，在莫匹罗星原料药杂质A、B、C中，实际样品的考察结果，杂质A、B、C的限量值分别为0.015μg、0.046μg、0.018μg、0.019μg，其含量均未超过限定值。该测定方法线性范围宽，检出限低，可用于莫匹罗星原料药及其有关物质的检测。

参考文献

[1] 严荧燕,卢韵碧,王炳涛,等.莫匹罗星温敏水凝胶的制备和性能研究[J].中国现代应用药学,2021,38(19):2381-2388.

[2] 吴博,王铁柱,拜年,等.用反相高效液相色谱法同时测定复方酮康唑软膏中三组分的含量[J].药学实践杂志,2021,39(02):152-156.

[3] 张秉华,王小亮,梁亚伟,等.莫匹罗星软膏有关物质测定方法的建立[J].中国抗生素杂志,2020,45(03):306-310.