中国结合医学2023年4期

肺癌患者血清HIF-1α和CEA水平检测及其与放疗敏感性的相关性分析

陈冬 赵向荣 殷航

  聊城市人民医院  山东聊城 252000

【摘要】目的：分析肺癌患者血清缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和癌胚抗原（CEA）水平检测及其与放疗敏感性的相关性；方法：回顾性分析我院在2021年3月到2023年3月收治的80例肺癌患者进行分析，对其实施血清HIF-1α、CEA水平检测，分析80例患者血清HIF-1α、CEA水平检测中放疗的相关数据；结果：80例患者中，年龄、性别、吸烟史均无统计学意义（P>0.05）；分期具有统计学意义（P<0.05）；HIF-1α、CEA检测放疗后与放疗前对比，具有统计学意义（P<0.05）；肺癌患者HIF-1α检测、CEA检测≥7个月均有统计学意义（P<0.05）；CEA检测<7个月具有统计学意义（P<0.05），HIF-1α检测<7个月无统计学意义（P>0.05）；结论：血清HIF-1α、CEA检测不仅具有高效、灵敏、方便、经济、创伤小等优点，而且对预测治疗效果、疾病早期判断、指导治疗方案选择、改善预后具有重要意义，具有广泛的应用价值。

【关键词】：肺癌；血清HIF-1α；CEA水平；检测；放疗敏感性；相关性

肺癌是人类最常见的恶性肿瘤，发病率和死亡率正在迅速上升，多数肺癌患者在就诊时已经失去了接受手术的机会，预后效果非常差，5年生存率不超过15%。放疗是癌症患者的主要治疗方法[1]。因此，如何及时有效地评估放疗的疗效，尽早预测复发和转移，及时干预对提高疾病控制率和延长生存期具有重要意义。CEA是目前最常用的肿瘤标志物，也是免疫球蛋白家族的一员，是胎儿胃肠道上皮细胞、胰腺和免疫球蛋白家族的成员，是由肝细胞合成的。出生后水平下降，而肺癌和胃肠道恶性肿瘤在一定程度上增加，而正常人的含量很低[2]。参与肿瘤细胞之间以及肿瘤细胞与基质胶原之间的粘附反应，作为早期检测的肿瘤标志物之一，可以反映肿瘤的生长和转移。血清CEA在肺癌患者中的阳性率明显高于其他癌症。作为实体瘤的特征之一，缺氧是促进恶性进展、远处转移以及对放疗和化疗产生耐药性的常见原因。近年来，调控基因包括血管内皮生长因子在内的多个核心肿瘤相关靶基因的研究一直都是热点和难点[3]。基于此，本次研究，选择我院收治的80例肺癌患者进行分析，对其实施CEA与HIF-1α检测，并从预后方面评价肺癌放疗的疗效和临床应用价值。

1资料与方法

1.1临床资料

回顾性分析在本院接受治疗的肺癌患者80例（入院时间范围：2021年3月到2023年3月），80例患者中，男性44例，女性36例，患者年龄区间：30~70岁，平均为：（55.25±2.57）岁；本次研究均通过我院伦理委员会审核、批准；80例患者均自愿加入本次研究，并且已经签署相关文件。

纳入标准：（1）使用具有完整临床数据的患者进行准确的临床分期；（2）有明确的组织病理学诊断；（3）由于原发性患者、局部晚期或临床原因而无法进行手术，只能接受同步放化疗的患者；（4）放疗无禁忌症，期间可接受≥2个周期的一线含铂方案化疗；（5）均有放疗前后的影像学及CEA、HIF-1α检查结果；（6）病例资料记录完整。

排除标准：（1）其他部位有肿瘤或既往接受过恶性肿瘤放疗的患者；（2）放疗前影像学和CEA、HIF-1α检查结果缺失；（3）案例数据记录不完整。

1.2方法

1.2.1治疗方案：采用含铂类的两药一线化疗方案，化疗周期为21天；放疗6周左右，放疗总剂量60-66Gy，每日常规分割照射1.8-2.0y/次。在放疗期间，提供症状支持治疗。

1.2.2标本采集：早上采集患者空腹静脉血5ml，自然凝集30分钟，以4000rpm离心15分钟后分离血清，储存温度为-20℃。

1.2.3检测方法：所有患者在放疗前1周内以及放疗结束后1周内使用双抗体夹心法（ABC-ELISA）检测血清CEA和HIF-1α水平，并严格按照仪器和试剂说明书进行操作。

血清CEA水平Elisa测定：（1）用去离子水以1:24的比例制备清洁溶液。在工作溶液中以1:20的比例制备CEA生物质抗体和示踪剂；（2）在每个孔中加入25ul样品稀释剂、25ul标准样品和25ul待测样品，充分反应、洗涤，并加入100ul工作溶液，在室温下振动1小时；（3）用清洗液清洗每个孔5次；（4）在每个孔中加入100ul肿瘤标记物B-HRP底物，在37℃的黑暗环境中显色，并加入100ulHRP终止溶液；（5）使用Anthos2010酶标记在620nm处测量吸光度。

血清HIF-1α水平Elisa测定：（1）在酶标记板的每个孔中加入稀释至50μl的标准品和稀释至50ul的血清样品，然后分别测量HIF-1α在每个孔中倒入由100μl添加的生物量抗体制成的工作溶液，盖上薄膜，轻轻摇晃混合，在室温下孵育1小时；（2）将液体倒入孔中，用清洗液清洗酶标记物3次，将吸水罐中的酶标记物倒置，并在吸水纸上拍尽残余液体；（3）向每个孔中加入80μl肿瘤标志物B-HRP底物，并在室温下在37℃的黑暗中反应30分钟；（4）在向每个孔中加入50μl终止溶液后立即测定结果；（5）在450nm的波长下测量每个孔的外径。

1.3观察指标

（1）统计所有患者的年龄、性别、吸烟、分期、CEA、HIF-1α指标。（2）根据影像学检查结果，实体瘤疗效评价标准（RECIST 1.1）分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、疾病稳定（SD）和疾病进展（PD）。对比放疗前后各项阶段CEA、HIF-1α的水平，根据影像学检查（MRI、CT或B超）的结果，在放疗结束后进行客观疗效评估。（3）统计肺癌不同时间（≥7个月、<7个月）放疗前后CEA、HIF-1α指标。

1.4统计学方法

采用SPSS22.00软件对数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（`x±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以n（%）表示，组间比较采用x2检验。以（P<0.05）表示差异有统计学意义。

2结果

2.1分析各临床特征和患者血清肿瘤标志物的关系

80例患者中，年龄、性别、吸烟史均无统计学意义（P>0.05）；分期具有统计学意义（P<0.05）；有关详细信息，请参见表1。

表1分析各临床特征与患者血清肿瘤标志物的关系（`x±s）

2.2对比血清肿瘤标志物水平变化与不同放疗疗效的关系

HIF-1α、CEA检测放疗后与放疗前对比，具有统计学意义（P<0.05）；有关详细信息，请参见表2。

表2对比血清肿瘤标志物水平变化与不同放疗疗效的关系（`x±s）

2.3对比肺癌患者放疗前后肿瘤标志物水平变化

肺癌患者HIF-1α检测、CEA检测≥7个月均有统计学意义（P<0.05）；CEA检测<7个月具有统计学意义（P<0.05），HIF-1α检测<7个月无统计学意义（P>0.05）；有关详细信息，请参见表3。

表3对比肺癌患者放疗前后肿瘤标志物水平变化（`x±s）

3讨论

肺癌在全球范围内呈上升趋势，是导致癌症死亡的最常见原因。在过去10年中，吸烟模式的改变、对癌症遗传学的理解的突破、免疫系统在癌症控制中的作用以及癌症治疗方法的选择，对于肺癌的治疗和预后都有重要影响[4]。肺癌是全世界最常见的癌症，不分性别，发病率和死亡率都在上升。肺癌是一种分子异质性疾病，了解其生物学特性对于开发有效的治疗方法至关重要。与大多数恶性肿瘤一样，肺癌由细胞亚群或克隆组成，具有显著的分子特征，常常导致肿瘤内部的异质性[5]。较大的亚克隆突变分数可能与局部LUAD患者术后复发的可能性增加有关，意味着肿瘤内异质性增加的肿瘤在肿瘤发展的早期阶段有更大的转移趋势。

在临床工作中，RECIST标准被用作肿瘤治疗反应的评估指标。然而，RECIST标准包括胸膜转移、胸腔积液、多发性肺微转移，不适用于评估不可测量病变（包括不规则病变）患者的肿瘤治疗反应[6]。肿瘤标记物是肺癌细胞或宿主细胞在癌症细胞侵袭过程中产生的物质，用于反映肿瘤的存在和恶性程度，存在于血液、体液和组织中。它们与肿瘤的预后密切相关，是影像学检查的重要辅助和补充手段[7]。目前，已知多种肿瘤标志物在不同的恶性肿瘤中表达。如何筛选肺癌中高表达的肿瘤标志物，准确反映放疗的预后至关重要。

CEA是最早用于癌症检测的肿瘤标志物之一，对癌症的阳性诊断率为40%至50%。研究表明[8]，当血清CEA阈值为3.2ng/ml时，CEA诊断癌症的特异性和敏感性分别为68%和69%。在6.4ng/ml的阈值下，特异性为95%，敏感性为41%。HIF-1是HIF-1α和HIF-1β、HIF-1α为主要氧调节亚基的二聚体组成。研究表明[9]，肺癌组织中肿瘤快速增殖或局部缺氧，以及一些炎症因子引起的抑癌基因突变导致肿瘤组织中HIF-1α表达增加，与肿瘤分期和淋巴结转移密切相关。研究表明，HIF-1α特别是在转移性肿瘤中，在许多原发性恶性肿瘤中表达水平升高。HIF-1α可促进肿瘤细胞的局部侵袭和转移、过度和永久性的细胞增殖、肿瘤血管生成以及细胞增殖周期比例的变化[10]。HIF-1α可以降低细胞选择性，增加多药耐药基因的表达，降低肿瘤细胞对放疗的敏感性。

本次研究结果显示，80例患者中，年龄、性别、吸烟史均无统计学意义；分期具有统计学意义；HIF-1α、CEA检测放疗后与放疗前对比，具有统计学意义；肺癌患者HIF-1α检测、CEA检测≥7个月均有统计学意义；CEA检测<7个月具有统计学意义，HIF-1α检测<7个月无统计学意义（P>0.05）；这与黄念、王紫阳[11]的研究结果基本一致，这表明放疗前后血清HIF-1α、CEA浓度的变化是疗效评估的可靠指标，具有病理类型特异性。分析原因可能是，HIF-1α、CEA的下降率是影响肺癌预后的独立因素，CEA表达水平的变化与腺癌的预后密切相关。

综上所述，血清HIF-1α、CEA检测不仅具有高效、灵敏、方便、经济、创伤小等优点，而且对预测治疗效果、早期判断、指导治疗方案选择、改善预后具有重要意义，具有广泛的应用价值。

参考文献：

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[2]杭青青,应航洁,程国平,等.微环境中巨噬细胞、肿瘤新生血管及PD-L1的表达及其与非小细胞肺癌患者预后的关系[J].中国肺癌杂志,2020,23(10):837-844.

[3]魏少贤,牛锐,杨海林,等.沉默lncRNAHOTTIP通过上调miR-663a表达增加非小细胞肺癌细胞系放射敏感性[J].中华放射肿瘤学杂志,2020,29(7):563-568.

[4]吕颖,刘靖,盛琛.卡瑞利珠单抗联合同步放放疗在驱动基因阴性非鳞肺癌脑转移患者中的近期疗效及安全性观察[J].肿瘤药学,2021,11(4):491-496.

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[7]陈曲,王嵬.血清转化生长因子-β水平对局部晚期非小细胞肺癌放疗后重症放射性肺炎的预测价值[J].中国肿瘤临床与康复,2020,27(10):1228-1231.

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[11]黄念,王紫阳.解氏肺癌三号方在非小细胞肺癌患者放放疗治疗中的应用及对血清肿瘤标记物、放疗毒副反应的影响[J].四川中医,2020,38(4):97-100.