药物与人2023年11期

微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用

徐量 杨宪伟 范光谱

山东鲁抗医药股份有限公司（山东 济宁）272000

【摘要】现阶段，在药品生产行业中，药品无菌化应用已经成为了焦点话题。尤其是近几年一些因药品安全问题引起的事故更是引起了人们的关注。因此，无菌药品生产是当前我国药物生产中的重中之重。在无菌药品的生产中，微生物鉴定技术发挥了十分重要的作用。本文对无菌药品生产中微生物鉴定技术的应用展开综述。

【关键词】微生物鉴定技术；无菌药品生产；综述

现阶段，药品安全问题已经成为人们重点关注的问题，无菌药品生产对于微生物鉴定技术的要求也在不断提高，国家对无菌药品生产的要求也越来越高。目前，我国无菌药品生产企业中绝大多数都已满足了GMP对无菌药品生产的相关要求。但是仍不可否认的是，在无菌药品的生产过程中微生物鉴定技术仍有待加强，而且相关的管理体系也不够完善[1]。微生物对于药品的质量、安全均可造成较大影响，尤其是对免疫力低下人群而言，其影响更大。因此在无菌药品的生产过程中必须要持续加强微生物鉴定技术的应用以期提升无菌药品的药效。

1、无菌药品生产行业中微生物鉴定技术的应用

很多因素都会对药品卫生检测结果造成影响，因此在生产无菌药品时微生物检测结果的准确性就十分重要。同时，还需要不断对微生物检测技术进行优化。近年来，我国不断发生一些药品安全问题，若想保障无菌药品的质量，对其进行微生物检测是重要的途径。该论断看不到微生物检定技术的影子，只是进行微生物检测的必要性。与标题不一致

2、无菌药品生产领域中应用的微生物鉴定技术

早在2010年，GMP即对食品和药品生产企业提出了新的要求，尤其是对无菌药品，提出了从其生产加工开始直至仓储运输等各个环节都要确保其安全、卫生，微生物可严重影响无菌药品的质量，因此，对其原辅料、生产加工环节、生产加工环境等各个环节都要进行严格的微生物鉴定[1]。

2.1 PCR技术

此技术利用扩增产物的方式来增加DNA数量，然后利用荧光条进行检测，此种方式的优点在于操作十分便捷，而且该技术已经十分成熟，具有较高的敏感度，而且检测耗时较短。PCR技术用于NDA扩增，与微生物鉴定的关联是什么？

2.2基因芯片技术

此技术是利用先进的微加工技术将基因的寡核酸苷酸进行排序，排序时的载体是硅片等，最终会形成高密度排序的形式，此技术也被称作信息检测芯片。此技术的应用领域十分广泛，对无菌药品生产进行检测时，应用此技术可对致病源进行全面检测。当前，基因检测技术仍在不断的发展和优化，自动化检验程度也越来越高，操作过程也在不断简化，准确性也越来越高。

2.3基因探针技术

此技术主要是对已经标记的核苷酸序列通过同位素或是生物素、地高辛等来检测。它的检测原理如下：通过分子杂交并结合目的基因，再利用所产生的信号对目的基因进行探测。探针标记主要分为两种，一种是同位素，另一种是非同位素。探针标记后具有较强的特异性，而且可提高检测速度。但是在检测过程中会产生放射性污染，因此需要加强防护以避免受到辐射损伤[2]。该技术如何与微生物鉴定关联？

2.4基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS），简单来讲，此技术是针对菌种进行鉴定的技术，它的鉴定基础是微生物核糖体及外周蛋白保守性和特异性。此技术的优点在于检测速度极快，3min内就可得到检测结果。而且具有较高的灵敏度，能够有效识别0.1µL的菌液，能够迅速鉴别不同菌株，尤其在鉴定苛养菌和厌氧菌方面具有较为突出的优点。此外，此技术的准确率可达到95%以上。

但是，此技术也并不是在任何鉴定中都具有优势，它在鉴定丝状真菌时的准确性就不高。分析原因可能是丝状真菌菌体破壁不完全，提取菌体蛋白难度高所致。不过，后来经研究发现，提前处理沙氏葡萄糖液体培养基能够有效解决丝状真菌蛋白提取困难的问题，进而可提升鉴定准确率[2]。此外，个别情况下此技术也会对菌体产生误判，常见的情况即是误将志贺菌判断成大肠埃希菌，这两种菌体的遗传背景较相似，DNA序列相关性也很高，菌体蛋白特征峰也相近。

2.5 16SrRNA基因测序技术

16SrRNA 是核糖体RNA的一个亚基，存在保守区和可变区两个区域[3]。前者主要反应亲缘关系，后者主要体现了不同生物物种的特异性。在进行微生物鉴定时，利用16SrRNA基因主要是根据遗传物质和分子水平，目前此技术已在业内受到了普遍的认可。

2.6 VITEK2Compact 系统

VITEK2Compact系统也就是全自动微生物鉴定系统，当我们在使用此系统进行鉴定时需要挑取单个菌落，并将其与相应浓度的菌悬液混合后根据菌落的形态及革兰氏染色结果将其接种至对应的鉴定卡上，读取鉴定卡内各孔培养基生长变化值并以此确定菌株的种属。

鉴定卡共有64个卡孔，适用范围十分广泛，在同一时间段内可以同时开展多项生理生化试验，通常情况下，6-8h即可获得一般性试验结果，若是酵母菌试验的结果会相对长一些，大约需要18h。VITEK2Compact具有十分明显的优势，即操作简单、耗时短。

由于VITEK2Compact是将菌种的生理生化特性作为主要的判断依据，受到菌种特殊性的影响，其生长情况可影响鉴定结果的准确性。在储存菌种时应格外注意储存的时间以及稳定性。这是因为，部分菌种保存时间越长鉴定结果的准确率就会越低，因此最好能够使用新鲜菌种[3]。

3、小结

综上所述，无菌药品生产过程中微生物检测技术直接关系到了药品的质量及安全，因此应该注重微生物鉴定技术的研究及优化，以不断提升无菌药品的质量。

参考文献

[1]王忠华.微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用[J]. 消费导刊, 2019，(44):2+13.

[2]王孟珠,吴文秀.微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用[J].临床医药文献电子杂志,2019,6(23):195.

[3]王元红.微生物鉴定技术在无菌药品生产中的应用[J].当代化工研究,2021(13):121-122.